Оценка качества эмбрионов в программах эко

Развитие эмбрионов после переноса в матку: что происходит по дням

После переноса в матку развитие эмбриона заключается не только в делении бластомеров – клеток зародыша и имплантации.

Происходит целый каскад уникальных процессов:

Биохимических.

Увеличивается количество лизосом и активизируется синтез ферментов, необходимых для лизиса (растворения) эндометрия в процессе имплантации. При появлении клеток плаценты начинается синтез гормона ХГЧ.

Биофизических.

Возникновение и укрепление межклеточных связей, разделение клеток на группы: образование наружного слоя, полости и внутренней клеточной массы. Увеличение клеточного объема и возрастающее давление изнутри на прозрачную оболочку, покрывающую зародыш, приводит к хетчингу (разрыву Зоны Пеллюцида и выходу эмбриона из оболочки). Благодаря межклеточным связям каждый бластомер «знает» где его место и какая функция ему предназначена. Со временем будет происходить их дифференцировка, и они начнут отличаться по строению.

Трофические (питательные).

На начальных этапах развития эмбрион питается за счет разрушенных клеточных структур эндометрия. А позже тип питания меняется, и необходимые вещества будут поступать из крови материнского организма.

Формируются ткани зародыша и внезародышевые органы.

Что происходит после переноса эмбрионов в матку и подробное описание развития эмбрионов по дням после переноса можно отследить в таблице 1.

Таблица 1. Развитие эмбрионов отличного и хорошего качества по дням до и после переноса

День после оплодотворения	День после переноса ДПП трехдневок	День после переноса ДПП пятидневок	Развитие эмбриона по дням до и после переноса	Стадия развития
		Происходит слияние женской и мужской гамет. Первые 12 часов самые важные в судьбе эмбриона, так как формируется кариотип – набор хромосом, отвечающий за все процессы развития и выживания. Устанавливается половая принадлежность	Зигота
1			Начинается деление клеток – бластомеров. В этот период их уже 2 или 4	Зигота
2			Деление продолжается. Сейчас должно быть 6 или 8 бластомеров	Зигота
3	Происходит перенос трехдневных эмбрионов		Количество бластомеров увеличивается до 10-16. Процесс компактизации бластомеров влечет за собой упрочнение межклеточных связей	Морула
4	1 ДПП		Внутри эмбриона появляется полость. Бластомеры разделились на 2 группы. Каждая теперь будет выполнять определенную функцию. В работу включается собственный геном бластоцисты (от того насколько он правильно сформирован зависит по какому плану пойдет дальнейшее развитие эмбриона)	Бластоциста
5	2 ДПП	Перенос эмбрионов на 5 день культивации	Инициируется процесс хетчинга – эмбрион выходит из белковой оболочки, и получает возможность прикрепиться к слизистой матки. В протоколе ЭКО при продленной культивации и отсутствии естественного выхода из оболочки может рекомендоваться вспомогательный хетчинг	Бластоциста
6	3 ДПП	1 ДПП	Хетчинг завершается, в эмбрионе происходят изменения, способствующие имплантации. Происходит первый контакт с поверхностью эндометрия. Бластоциста прилипает к стенке матки	Бластоциста
7	4 ДПП	2 ДПП	Эмбрион начинает погружаться в стенку матки, его окружают клетки эндометрия	Бластоциста
8	5 ДПП	3 ДПП	Из наружного слоя одноклеточного эпителия начинают формироваться ворсинки трофобласта, при помощи которых эмбрион начинает прорастать в стенку, получать кислород и питательные вещества, выводить продукты обмена. В трофобласте растет количество лизосом, содержащих ферменты	Гаструла
9	6 ДПП	4 ДПП	Вырабатываемые ферменты расплавляют ткань и сосуды эндометрия (мелкие артерии и вены), что позволяет эмбриону глубже проникнуть в стенку матки. Участки эндометрия между прорастающими ворсинками заполняются кровью. Иногда женщины наблюдают небольшое выделение крови из влагалища – это имплантационное кровотечение, завершающееся в течение нескольких часов	Гаструла
10	7 ДПП	5 ДПП	Заканчивается процесс имплантации – эмбрион полностью погружается в стенку, дефект в эндометрии начинает покрываться эпителием. Формируется плацента	Гаструла
11	8 ДПП	6 ДПП	Клетки плаценты начинают выделять «гормон беременности» – ХГЧ	Гаструла
12	9  ДПП	7 ДПП	Уровень ХГЧ постепенно нарастает	Гаструла
13	10 ДПП	8 ДПП	Гаструла
14	11 ДПП	9 ДПП	День определения ХГЧ. Уровень гормона достаточно вырос для подтверждения беременности	Эмбрион

На какой день лучше провести ПГД на 3 или на 5?

Последние исследования показали, что биопсия эмбрионов для ПГД на третьи сутки дает высокий риск остановки развития. Плюс к этому у зародыша на 3 сутки высокий уровень мозаицизма (клетки генетически отличаются), что влечет появление ложных результатов и повышает процент ошибки.

Широко используется ПГД эмбриона на 5 сутки, поскольку биопсия для него менее травматична, а материала для исследования больше.

Другие преимущества ПГД для удачного ЭКО:

• бластоцисты легче переносят биопсию;
• выше частота наступления беременности;
• низкий риск остановки развития.

Существует понятие «полная бластоциста» – это когда произошла полная дифференциация клеток эмбриона и под микроскопом четко видна внутриклеточная масса и трофэктодерма. Именно таким бластоцистам делают предимпланационную генетическую диагностику.

Существует понятие «ранней бластоцисты». У них дифференцировка еще не завершилась. Такие эмбрионы не подвергают биопсии, а продолжают культивацию до 6 суток и после завершения дифференцировки делают ПГД.

Цели и преимущества анализа ПГД

Предимплантационная генетическая диагностика ПГД при ЭКО – это метод исследования генома до переноса эмбриона в полость матки. Главная цель – выбор эмбриона для подсадки без генетических патологий, носителями которых являются родители.

Для успешной беременности важно перенести не просто качественный, но и «здоровый» в генетическом плане зародыш. Основное преимущество ПГД – это снижение риска прерывания беременности, как самопроизвольных абортов, так и искусственного прерывания в случае выявления патологии на перинатальном этапе (т

е, когда беременность уже наступила).

Почему при обследовании не видно плодного яйца

Будущие матери часто задают один и тот же вопрос: когда на УЗИ видно плодное яйцо? Нередки случаи, когда на 8 или даже 12 неделе сердцебиение плода не прослушивается и его самого не видно. Не стоит отчаиваться! Ультразвуковая диагностика не всегда дает 100% информацию. На результат может повлиять множество факторов, как технических, так и человеческих. Врачами рекомендовано проводить несколько исследований для подтверждения полученной информации. Это не только УЗИ, но и лабораторные анализы, гинекологические осмотры.

Как ни прискорбно осознавать, но неточности ультразвуковой диагностики прервали жизнь не одного малыша, и все-таки это единичные случаи, встречающиеся не так часто. В основном УЗИ дает достоверный результат, а при опасности возникновения замершей или внематочной беременности необходимо пройти более глубокое обследование.

Если УЗИ не обнаруживает эмбрион в плодном яйце, необходимо провести анализ крови на ХГЧ (хорионический гонадотропин человека). При положительной динамике уровень этого гормона повышается пропорционально неделям гестации. Нельзя исключать возможность неправильного исчисления срока. Возможно, он мал для того, чтобы увидеть плод на приборах. Врачи считают срок беременности акушерскими неделями, то есть с первого дня менструации включительно, так что ошибки в подсчетах встречаются часто. Стоит обратиться в другое медицинское учреждение и снова пройти УЗИ и анализы. Не торопитесь соглашаться на чистку, пока не исчерпаете все возможные варианты.

То, на какой неделе видно эмбрион на УЗИ, а не только плодное яйцо, его окружающее, во многом зависит от индивидуальных особенностей организма и места закрепления яйцеклетки в матке. Немаловажную роль играет современное оборудование. Обычно эмбрион показывается на 6-7 неделе после зачатия.

Всевозможные мифы об УЗИ:

1. УЗИ негативно влияет на внутриутробное развитие плода. Нет никаких доказательств, подтверждающих или опровергающих этот факт. Ученые и врачи сходятся во мнении, что всего должно быть в меру. При нормальном течении беременности достаточно 3 плановых УЗИ-обследований. Только при патологиях или угрозе выкидыша количество исследований может быть увеличено. Часто УЗИ не рекомендуют делать на ранних сроках беременности, а вот ближе к родам можно пройти 3D-обследование и получить картинку на память. Плод на последних неделях уже сформировался, и ультразвуковые волны не причинят ему вреда.
2. Под влиянием ультразвуковых волн изменяется ДНК. Во время проведения УЗИ волны проникают к объекту и отталкиваются от него, что позволяет сформировать картинку. Весь процесс создает только механическое колебание тканей внутри утробы матери. Исследования на беременных мышах не выявили никаких генетических изменений, вызванных применением ультразвука.
3. Противоестественный характер УЗИ. Это вопрос субъективного восприятия. Диагностика является добровольной процедурой, желание ее пройти зависит только от родителей будущего малыша.
4. УЗИ — это эксперимент. В этом есть доля правды. Изучение пренатальной жизни плода дает массу материала для научной работы. Полученные знания и опыт позволяют спасать жизни матерей и детей по всему миру.

В любом случае для проведения УЗИ-диагностики необходимо согласие матери. Главное — следить, чтобы врач использовал современное оборудование с низким уровнем излучения.

Вредно ли УЗИ при беременности

Очень часто на форумах можно встретить мнение, что УЗИ во время беременности, а особенно в первом триместре, очень вредно. Даже приводятся примеры — «в прошлую беременность я сделала УЗИ и плод замер, а в эту не делала УЗИ и все отлично». На самом деле это субъективное мнение, основанное на случайном совпадении. Исследований на эту тему проводится очень много, но пока никто не смог доказать конкретный вред, который приносят ультразвуковые волны малышу в утробе; как, допустим, доказан вред рентгеновских лучей. Конечно, не стоит фанатично ежедневно, еженедельно делать УЗИ, но и игнорировать это исследование из-за его мифического вреда тоже не стоит.

Первые ультразвуковые исследования при беременности для большей точности делают вагинальным датчиком. Никакой специальной подготовки не требуется.

Как происходит оценка качества эмбрионов при ЭКО

Оценка качества эмбрионов при ЭКО происходит ежедневно. У ЭКО ИКСИ – есть преимущество – эмбриолог точно знает время оплодотворения в отличие от классического ЭКО, так как проводит процедуру самостоятельно. Это позволяет вести наблюдение за развитием с момента оплодотворения и оценивать эффективность развития более точно.

Сейчас существует оборудование, позволяющее вести запись дробления, которая используется для выбора самого качественного эмбриона. Характеристики, полученные при оценке, записываются в журнал, чтобы иметь возможность отслеживать динамику. Сразу после оплодотворения – слияния полярных телец яйцеклетка должна поделиться и образоваться два бластомера. Если этого не происходит или образуется больше клеток – эмбрион оценивается как некачественный.

Для определения хороший эмбрион или плохой существует много критериев:

• Внешний вид. Клетки должны быть правильной, равной и симметричной формы, внешняя оболочка – без утолщений.
• Соответствие дню развития по количеству клеток.
• Степень фрагментации – процентное соотношение безъядерных клеток (их еще называют кусочки цитоплазмы) к нормальным бластомерам (клеткам). Цитоплазматическая фрагментация бластомеров – это отсоединение от клетки фрагментов цитоплазмы, окруженной мембранной, но без ядерного содержимого. В норме каждый бластомер должен иметь ядро. Чем выше процент фрагментации, тем хуже прогноз для дальнейшего развития. Считается, что 25% фрагментации – вариант нормы. Часто мелкие фрагменты могут опять участвовать в дальнейшем построении других клеток. Фрагментация более 25% – признак снижения жизнеспособности. Тем не менее, фиксируются случаи, когда зародыши с высокой степенью фрагментации на 5 и 6 день становятся качественными или бластоцистами. Поэтому фрагментированные эмбрионы не отбраковываются а культивируются до 5–6 суток. У них есть шанс.
• Размеры. Клетки должны быть равными по объему и правильной формы.
• Наличие включений. Любые включения – неблагоприятный признак. Вакуоли – цитоплазматические включения, окруженные мембранной и содержащие жидкость, снижают частоту формирования хороших эмбрионов. Зиготы с выраженными вакуолями могут не вступать в дробление или происходит цитолизис – разрушение клеток.
• Равномерность деления, чем короче промежуток времени эмбрион имеет непарное количество бластомеров, тем лучше. Например, короткий промежуток между тремя и четырьмя клетками говорит о том, что два бластомера на двухклеточной стадии поделились равномерно. Кроме этого, деление должно происходить в определенное время.

Эмбриологический этап

Главным действующим лицом на этом этапе становится врач-эмбриолог. Эмбриологический этап – самый важный в циклах экстракорпорального оплодотворения. От его правильности зависит успешноcть всей процедуры.

Для культивирования яйцеклеток и эмбрионов нужны особые условия – оптимальное соотношение:

• влажности;
• температуры;
• газового состава.

Сочетание заданных условий возможно только в специальных инкубаторах. Выбранные параметры  в них поддерживаются автоматически. В период до 5 дней эмбрионы будут развиваться в инкубаторе.

К средам, в которыхкультивируются эмбрионы, тоже жесткие требования. Они должны имитировать внутреннюю среду женского организма.

Во время трансвагинальной пункции эмбриолог занят поиском ооцит-кумулюсных комплексов, в которых и находятся сами яйцеклетки. Фолликулярную жидкость, после изучения под микроскопом, переливают в чашки Петри. Даже невооруженным взглядом можно рассмотреть эти комплексы, содержащие яйцеклетку. Это слизистые комочки, диаметром 5–10 мм. До момента оплодотворения они содержатся в специальной питательной среде.

Параллельно в это время происходит обработка спермы. Задача при обработке спермы – выделить фракцию самых активных, морфологически нормальных, подвижных сперматозоидов, наиболее способных к оплодотворению.

На эмбриологическом этапе проводится оплодотворение, как правило, спустя 4–6 часов после трансвагинальной пункции. В чашку Петри с яйцеклеткой добавляется концентрат сперматозоидов в количестве 100000 на 1 яйцеклетку. При неудачных предыдущих попытках ЭКО и аномалиях сперматозоидов у супруга доктор рекомендует ИКСИ.

Только хорошие ооциты подходят для оплодотворения

Эмбриолог следит за действием буквально по часам, т.к возможны разные аномальные варианты развития, которые в клинике обязательно отслеживают и культивируют отдельно. Через 16–18 часов после проведения оплодотворения в ооците появятся специфические округлые структуры — пронуклеусы. Это предшественники ядер, содержащие генетический набор как мамы, так и папы.

Ооциты (NF, 1PN) откладываются в отдельныю капли и за ними также наблюдают. Если из такого ооцита получается отличный эмбрион, то вопрос о его переносе или заморозки решается совместное с репродуктологом, эмбриологом и пациентом.

Дальнейшее развитие эмбриона, дробление, происходит в течение 6 дней.

• 2PN — два пронуклеуса (нормальное оплодотворение). Именно такие эмбрионы культивируют дальше

• NF – пронуклеусов нет. Оплодотворение либо наступило, но пронуклеусы слишком быстро исчезли, либо ооцит просто не оплодотворился

• 1PN — один пронуклеус. В 25% случаев при 1PN эмбрион может быть диплоидным.

• NS — ооцит не выжил после процедуры ИКСИ

• 3PN и более — аномальный эмбрион. Перенос такого эмбриона запрещен, в клинике такие эмбрионы никогда не используют.

Оценка качества яйцеклетки

Для успешного оплодотворения нужны зрелые яйцеклетки, которые будут способны взаимодействовать со сперматозоидом. Как правило, у молодых женщин достаточно хорошее качество ооцитов. Однако после 35 лет оно заметно ухудшается. Специальная гормональная стимуляция, проводящаяся перед забором яйцеклеток, позволяет ускорить их созревание. Однако даже после стимуляции ооциты могут оставаться недостаточно зрелыми и качественными.

Как проверить качество яйцеклетки?

Оценка ооцита проводится сразу после их забора из яичников женщины. При этом проверка качества яйцеклетки представляет собой визуальное наблюдение, которое осуществляется с помощью бинокулярного микроскопа.

Качество ооцитов определяется по внешнему виду цитоплазмы, вителлинового слоя, полярного тельца. При хорошем качестве — цитоплазма должна быть однородной, одного цвета и с отсутствием гранул. О плохом качестве яйцеклетки говорит присутствие вакуолей, темная окраска, гранулы, деформации.

Проверка качества яйцеклетки позволяет провести отбраковку наиболее некачественных экземпляров и тем самым выбрать наиболее подходящий для процедуры ЭКО генетический материал. Зрелый ооцит обозначают аббревиатурой MII.

Кроме того необходимо проверить качество спермы мужчины и на основе полученных результатов определить способ оплодотворения с применением технологии ЭКО или ИКСИ. Оба репродуктивных метода представляет собой оплодотворение «в пробирке», но в первом случае сперматозоиды должны самостоятельно оплодотворять яйцеклетки, а во втором — сперматозоид искусственно вводится в яйцеклетку.

День пятый

На пятый день развития эмбрион достигает стадии, которая называется бластоциста. Это значит, что полость внутри эмбриона уже достигла 50% от его общего объема.

В отличие от предыдущих стадий развития, бластоциста состоит из разных клеток:

• Трофобласт. Находится снаружи. Эта часть эмбриона отвечает за его внедрение (имплантацию) в слизистую оболочку матки. Из него будет развиваться плацента и прочие внезародышевые оболочки.
• Эмбриобласт. Находится внутри. Из этих клеток в дальнейшем сформируются органы и ткани плода.

Именно на этой стадии в большинстве случаев врачи пересаживают эмбрион в матку женщины. Также их можно замораживать. Это делают, чтобы сохранить «лишние» эмбрионы на следующий цикл.

Весь эмбрион окружен блестящей оболочкой. После переноса эта оболочка разрывается. Бластоциста выходит наружу и встраивается в стенку матки. Этот процесс называется hatching, что означает «вылупление».

Некоторым супружеским парам проводят преимплантационную диагностику для раннего выявления хромосомных и генетических мутаций. В таком случае ПГД делают именно на данном этапе, когда часть клеток начинает выступать за внешнюю оболочку.

На данном этапе развития критериями качества эмбриона являются:

• размер внутренней полости;
• степень проникновения эмбриона за оболочку;
• количество и плотность клеток.

Размер внутренней полости оценивается цифрами, два других критерия – буквами.

Исходя из размеров, выделяют шесть степеней зрелости бластоцисты:

• 1 – полость внутри эмбриона менее 50% (ранняя бластоциста);
• 2 – полость внутри эмбриона более 50% от его объема;
• 3 – полость занимает весь объем эмбриона;
• 4 – полость увеличивается, а оболочка эмбриона становится тоньше (расширенная бластоциста);
• 5 – трофэктодерма (наружный слой бластоцисты) проникает сквозь блестящую оболочку;
• 6 – бластоциста «вылупляется» и покидает оболочку.

Клетки качественного эмбриона должны быть сгруппированными. Представьте себе теннисные мячики, которые упакованы внутри футбольного мяча. Чем их больше, и чем плотнее расположены, тем лучше эмбрион.

Данный параметр отражается буквами:

• А – плотно упакованный «футбольный мяч» с большим количеством клеток;
• В – среднее количество клеток внутри бластоцисты;
• С – малое количество клеток.

Оценивается также трофэктодермальный слой. Продолжая аналогию, можно сравнить его с кожей, из которой пошит футбольный мяч. Чем меньше сегментов (клеток), и чем плотнее они расположены, тем лучше.

Данный параметр тоже оценивается буквами латинского алфавита:

• А – много клеток;
• В – среднее количество клеток;
• С – мало клеток.

Соответственно, общая характеристика эмбриона отображается цифрой и двумя буквами. Например, запись 4АА означает, что эмбрион находится на стадии расширенной бластоцисты, внутри содержится много клеток, и снаружи его трофэктодерма тоже представлена большим количеством клеток.

Процесс развития эмбриона очень сложен. Процедура ЭКО считается удачно проведенной, если хотя бы 40% из них на пятый день развития достигли стадии бластоцисты хорошего качества.

Один или два эмбриона переносятся в матку. Остальные можно заморозить. Если текущий протокол ЭКО не завершится беременностью, их можно будет использовать в следующем цикле. В клинике ЭКО при заморозке используется метод витрификации, то есть сверхбыстрого замораживания, что позволяет защитить эмбрионы от повреждения кристаллами льда.

Искусственное оплодотворение и имплантация эмбриона

Искусственное оплодотворение (экстракорпоральное оплодотворение, ЭКО)в искусственных условиях с использованием специальных инструментов и техникЭКО может происходить посредством:

• Оплодотворения в пробирке. В пробирку помещается несколько зрелых яйцеклеток, к которым добавляется определенное количество сперматозоидов. В течение нескольких часов каждая из яйцеклеток может быть оплодотворена одним из сперматозоидов.
• Интрацитоплазматической инъекции сперматозоидов. В данном случае сперматозоид вводится непосредственно в яйцеклетку с помощью специальной аппаратуры.

эмбрионовслизистой оболочки маткипримерно через 14 дней с первого дня последней менструациивне организма женщиныназываемая также «подсадкой»

Чем отличается имплантация при переносе трехдневных и пятидневных эмбрионов при ЭКО?

экстракорпоральном оплодотворениитрехдневныепятидневныеЭКОбудущий эмбрионна 4 – 5 деньвероятность успеха составляет около 40%вероятность успеха составляет около 50%двухдневныеболее 5 днейНа выбор той или иной методики влияют:

• Количество оплодотворенных яйцеклеток. Если после скрещивания мужских и женских половых клеток оплодотворенными оказались лишь несколько яйцеклеток, рекомендуется пересаживать трехдневные эмбрионы. Дело в том, что пребывание вне женского организма может отрицательно влиять на жизнеспособность зародышей, в связи с чем вероятность их гибели повышается. Следовательно, чем раньше они будут перемещены в полость матки, тем выше будут шансы на успех процедуры.
• Жизнеспособность оплодотворенных яйцеклеток. Если в процессе скрещивания оплодотворенными оказались многие яйцеклетки, однако в течение первых 2 суток пребывания в инкубаторе большая часть из них погибла, также рекомендуется прибегнуть к имплантации трехдневных эмбрионов. Если же к третьему дню после оплодотворения число развивающихся зародышей достаточно велико, рекомендуется подождать еще 2 дня и выполнить перенос пятидневных эмбрионов. Шанс на успешное развитие беременности при этом повысится, так как пятидневный эмбрион считается более жизнеспособными, а сам процесс имплантации по времени будет максимально схож с таковым при естественном оплодотворении (то есть будет иметь место примерно на 6 – 7 сутки после овуляции).
• Неудачные попытки ЭКО в прошлом. Если при предыдущих попытках все оплодотворенные яйцеклетки погибали к 4 – 5 дню выращивания в инкубаторе, врач может прибегнуть к переносу трехдневных или даже двухдневных зародышей. В некоторых случаях это позволяет добиться наступления беременности.

когда первый сперматозоид проникнет в неепока не начнется имплантацияприкреплению мешает та самая оболочка оплодотворениявесь этот процесс занимает еще около 2 сутокболее зрелыйв течение нескольких часов

https://youtube.com/watch?v=VV6HOY-AhN8

Имплантация эмбриона после криопереноса в естественном цикле

на 20 – 23 деньэкстракорпорального оплодотворениято есть, если они не имплантировались в матку, и беременность не наступилакоторые перед введением в полость матки предварительно разморозятК преимуществам имплантации размороженных эмбрионов можно отнести:

• Отсутствие необходимости в повторной стимуляции овуляции. Перед обычной процедурой ЭКО (экстракорпорального оплодотворения) женщине назначают специальные гормональные препараты, что приводит к созреванию сразу нескольких фолликулов в яичниках (то есть к моменту овуляции созревает не одна, а сразу несколько яйцеклеток). При использовании методики криопереноса эмбрионов необходимость в этом отпадает. Врач просто определяет момент овуляции, после чего вычисляет время, в течение которого следует перенести размороженные эмбрионы в матку (обычно это 6 – 9 день после овуляции).
• Оптимальную подготовку эндометрия (слизистой оболочки матки) к имплантации. На фоне гиперстимуляции яичников (во время которой стимулируется одновременное развитие сразу нескольких яйцеклеток) наблюдается значительное нарушение гормонального фона женщины. Это может привести к неправильному и неполноценному развитию слизистой оболочки матки, в результате чего имплантация может не состояться. Перед пересадкой размороженных эмбрионов гиперстимуляцию не проводят, вследствие чего слизистая оболочка матки является более подготовленной для имплантации в нее эмбриона.
• Отсутствие необходимости в повторном получении мужских половых клеток. Так как заморозке подвергаются уже оплодотворенные яйцеклетки, заново получать семенную жидкость мужа или донора не нужно.

https://youtube.com/watch?v=-I2TWrgf2SM

День пятый

На пятый день развития эмбрион достигает стадии, которая называется бластоциста. Это значит, что полость внутри эмбриона уже достигла 50% от его общего объема.

В отличие от предыдущих стадий развития, бластоциста состоит из разных клеток:

• Трофобласт. Находится снаружи. Эта часть эмбриона отвечает за его внедрение (имплантацию) в слизистую оболочку матки. Из него будет развиваться плацента и прочие внезародышевые оболочки.
• Эмбриобласт. Находится внутри. Из этих клеток в дальнейшем сформируются органы и ткани плода.

Именно на этой стадии в большинстве случаев врачи пересаживают эмбрион в матку женщины. Также их можно замораживать. Это делают, чтобы сохранить «лишние» эмбрионы на следующий цикл.

Весь эмбрион окружен блестящей оболочкой. После переноса эта оболочка разрывается. Бластоциста выходит наружу и встраивается в стенку матки. Этот процесс называется hatching, что означает «вылупление».

Некоторым супружеским парам проводят преимплантационную диагностику для раннего выявления хромосомных и генетических мутаций. В таком случае ПГД делают именно на данном этапе, когда часть клеток начинает выступать за внешнюю оболочку.

На данном этапе развития критериями качества эмбриона являются:

• размер внутренней полости;
• степень проникновения эмбриона за оболочку;
• количество и плотность клеток.

Размер внутренней полости оценивается цифрами, два других критерия – буквами.

Исходя из размеров, выделяют шесть степеней зрелости бластоцисты:

• 1 – полость внутри эмбриона менее 50% (ранняя бластоциста);
• 2 – полость внутри эмбриона более 50% от его объема;
• 3 – полость занимает весь объем эмбриона;
• 4 – полость увеличивается, а оболочка эмбриона становится тоньше (расширенная бластоциста);
• 5 – трофэктодерма (наружный слой бластоцисты) проникает сквозь блестящую оболочку;
• 6 – бластоциста «вылупляется» и покидает оболочку.

Клетки качественного эмбриона должны быть сгруппированными. Представьте себе теннисные мячики, которые упакованы внутри футбольного мяча. Чем их больше, и чем плотнее расположены, тем лучше эмбрион.

Данный параметр отражается буквами:

• А – плотно упакованный «футбольный мяч» с большим количеством клеток;
• В – среднее количество клеток внутри бластоцисты;
• С – малое количество клеток.

Оценивается также трофэктодермальный слой. Продолжая аналогию, можно сравнить его с кожей, из которой пошит футбольный мяч. Чем меньше сегментов (клеток), и чем плотнее они расположены, тем лучше.

Данный параметр тоже оценивается буквами латинского алфавита:

• А – много клеток;
• В – среднее количество клеток;
• С – мало клеток.

Соответственно, общая характеристика эмбриона отображается цифрой и двумя буквами. Например, запись 4АА означает, что эмбрион находится на стадии расширенной бластоцисты, внутри содержится много клеток, и снаружи его трофэктодерма тоже представлена большим количеством клеток.

Процесс развития эмбриона очень сложен. Процедура ЭКО считается удачно проведенной, если хотя бы 40% из них на пятый день развития достигли стадии бластоцисты хорошего качества.

Один или два эмбриона переносятся в матку. Остальные можно заморозить. Если текущий протокол ЭКО не завершится беременностью, их можно будет использовать в следующем цикле. В клинике ЭКО при заморозке используется метод витрификации, то есть сверхбыстрого замораживания, что позволяет защитить эмбрионы от повреждения кристаллами льда.

Качество эмбрионов и риск невынашивания

От того, на какой стадии развития эмбриона будет осуществлен перенос, и какого качества будет зародыш, зависит вероятность имплантации плодного яйца с дальнейшим развитием плода. При этом не установлено достоверной зависимости частоты невынашивания беременности (отторжения плода) от качества зародыша человека.

По оценкам разных авторов, в 18-30% случаев при положительном анализе крови на ХГЧ (что подтверждает наступление беременности) дальнейшего формирования плода не происходит. Возможные неблагоприятные исходы:

• биохимическая беременность – уровень ХГЧ повышается, но на УЗИ оказывается, что формирования плода не происходит;
• самопроизвольный аборт – происходит в 1 триместре, если перенесенный эмбрион имеет генетические или хромосомные нарушения (некачественный генетический материал является причиной до 70% отторжения плода после ЭКО).

Эти исходы встречаются с одинаковой частотой при переносе зародышей любого качества. Плод в матке не развивается, если имеются генетические аномалии. Хотя встречаются и другие причины, которые нарушают формирование плода. Достоверно чаще самопроизвольные аборты встречаются у пациенток с:

• индексом массы тела свыше 25 кг/м2 (лишний вес);
• тромбофилиями (повышенной свертываемостью крови);
• патологией эндометрия;
• выкидышами или остановкой формирования плода в анамнезе.

Некоторые исследования показывают, что вероятность успешного формирования плода выше у тех женщин, у кого удалось получить более высокий процент эмбрионов наилучшего качества. В том числе в ситуациях, когда переносились зародыши человека категории В или С. По всей видимости, это связано с лучшим состоянием репродуктивного здоровья у таких пациенток, что отражается на свойствах эндометрия.

Как обследуют будущих мам?

Если тест на беременность оказался положительным, подтвердить это можно на ультразвуковом исследовании – диагностику осуществляют в коммерческом центре или в женской консультации

Важно знать, что немаловажную роль в получении достоверных результатов обследования играет аппаратура, имеющая высокий уровень разрешения и функциональных возможностей, а также квалификация специалиста

До 9 акушерских недель для обследования беременных женщин используют два способа:

• Трансабдоминальный – через область передней брюшной стенки.
• Трансвагинальный – с помощью трансдьюсера, который вводят во влагалище.

До 5 недель сформированное плодное яйцо очень мало – его размер составляет всего около двух миллиметров. Результативным методом диагностики эмбрионального периода считается именно трансвагинальный – его высокочастотный датчик дает возможность максимально приблизиться к маточной полости и передать на экран монитора мельчайшие размеры исследуемых органов.

Методика обследования будущей мамы с помощью высокочастотных волн неинвазивная и абсолютно безвредная – она позволяет врачу безопасно наблюдать за развитием плода

За весь период гестации женщине выполняют не менее трех ультразвуковых сканирований. Сеанс исследования кратковременный, врач старается не задерживать датчик долго на одном месте, особенно в период формирования важнейших органов и систем будущего младенца.

От чего зависит качество эмбрионов

В первую очередь качество эмбрионов зависит от полноценности половых клеток (мужских и женских).

Неблагоприятные факторы, влияющие на способность половых клеток оплодотвориться и давать здоровую беременность:

• Экология.
• Интоксикации – курение, алкоголь, бытовая химия, лекарственные препараты, растворители, бензин.
• Гинекологические заболевания – СПЯ, эндометриоз – гормональнозависимые процессы, оказывающие влияние на качество ооцитов.
• Ослабленный иммунитет.
• Хроническое переутомление.
• Избыточный вес. Происходит нарушение гормонального баланса.
• Ограничение в пище. Вегетарианство, пост создают дефицит аминокислот, витаминов, микроэлементов.
• Радиация – самый неблагоприятный фактор – нарушает физиологичность процессов деления и роста клеток организма, в особенности тех, которые быстро делятся;
• Частая смена климата и часового пояса приводят к хроническому стрессу.
• Гормональная стимуляция овуляции.

Важно! Пациенты должны полностью выполнять рекомендации врача по проведению стимуляции овуляции. Пропущенная инъекция или сделанная не вовремя – снижает вероятность получения ооцитов при пункции, качество яйцеклеток, а следовательно, и зародышей для переноса

Большое количество клеток при пункции фолликулов, в большинстве случаев, говорит об их низком качестве. Крайне редко бывает так, что из 10–15 полученных яйцеклеток оплодотворяются все и получается 10–15 бластоцист отличного или хорошего качества.

Для того чтобы улучшить качество эмбрионов для переноса перед входом в протокол ЭКО необходимо избегать неблагоприятного влияния перечисленных факторов или свести их к минимуму.

Классификация эмбрионов

Обычно проводится визуальная оценка качества подготовленных для переноса зародышей, а также особенности их развития. В день проведения пункции выполняется оплодотворение ооцитов и после этого специалист каждый день под микроскопом контролирует рост эмбрионов и классифицирует их с учетом определенной схемы.

Оценка качества эмбрионов осуществляется с учетом различных критериев в зависимости от времени суток.

В первые сутки после оплодотворения проводится оценка эффективности процедуры, и после этого обращается внимание на первое клеточное деление зародившегося организма. На 2 и 3 сутки начинается процесс дробления клеток эмбриона и оценивается количество бластомеров

На вторые сутки после оплодотворения их количество должно составлять 4-5, а на 3 сутки развития увеличивается до 6-8. Кроме этого, специалист обращает внимание на формы и размеры эмбрионов, а также присутствие фрагментации.

Чаще всего встречается цифро-буквенная классификаций по качеству зародышей второго — третьего дня. Она позволяет оценить степень фрагментации и количество клеток в эмбрионе. Обычно записывается число с буквой, где первый показатель отражает количество клеток в эмбрионе, а второй — процент фрагментации.

• А — говорит о том, что фрагментация полностью отсутствует:
• В — показатель фрагментации составляет 25%;
• С- уровень фрагментации увеличился до 25-50%;
• D-показатель фрагментации более 50%

Обычно зародыши с буквой D не подлежат переносу в полость детородного органа женщины и не консервируются.